猪蓝耳病抗体试剂盒注意事项
试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,使用前应摇匀,使用后放回2~8℃。 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。 底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。 TMB(底物B液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2~8℃)。 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。 严格遵守操作说明可以获得*的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。 血清稀释板为一次性用品,不得重复使用;血清稀释板的*容量为300μl/孔。
猪蓝耳病抗体试剂盒操作步骤
取预包被的检测板(根据样品*,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,取阴性及阳性对照各100μl
分别加入反应孔中,空白对照仅加入100μl样本稀释液。轻轻振匀孔中样品(勿溢出)。
盖上封板膜,置37℃温育30分钟。 小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗3次。每次用洗涤液注满板孔(约350μl),静置1分钟后甩掉。洗涤3次后在干净吸水纸上拍干。 每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。 小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤3次, 方法同2。切记*在干净吸水纸上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl,混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。 每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
结果判定
以空白对照调零用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度A值。试验成立的条件是阳性对照孔A450值大于或等于0.5,阴性对照孔A450值必须小于0.15。如果试验无效,试验中的操作值得怀疑,试验应重做,并仔细检察各组分。
样品A450值大于0.15+阴性对照孔均值,判为阳性;样品A450值小于0.15+阴性对照孔均值,判为阴性;如阴性对照孔均值小于0.05按0.05计算。
贮存方法: 2 - 8oC下贮存。
有效期: 12个月。
猪蓝耳病又称“猪繁殖与呼吸障碍综合征”,是由猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒引起,以成年猪生殖障碍、早产、流产和死胎,以及仔猪呼吸异常为特征的传染病,是一种免疫抑制病,常常继发其他病原感染。
世界上许多国家和地区都发生过猪蓝耳病。该病于上世纪90年代中期传入中国,世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,中国列为一类动物疫病。